CAR-T的生产流程有哪些？

这个我知道，答案都来自报告《医药行业细胞基因治疗CDMO深度报告：厚积薄发，搭乘新世代药物发展浪潮》，如果有兴趣了解更多相关的内容，请下载原报告阅读。

1.T 细胞的采集及激活

1）从患者（自体型）或健康志愿者（通用型）的血液中分离出免疫 T 细胞。2） 活化并刺激分离得到的 T 细胞在体外增殖，便于转导。GMP 生产中，常使用带 有 CD3/CD28 单抗的磁珠、或者联用单抗磁珠和白介素来激活 T 细胞。

2.T 细胞的基因修饰

1）CAR 基因导入

CAR-T 制备最关键的一环是利用病毒或非病毒载体将 CAR 基因导入 T 细胞。转 导后的 T 细胞可以稳定表达 CAR 结构，从而识别肿瘤细胞并进行杀伤。

2）T 细胞基因编辑

目前业界还开展了对 T 细胞基因编辑的研究，以期改善 T 细胞的活性，增强疗 效。对通用型 CAR-T，敲除免疫原性基因、减少排异反应是此类产品是否可以成 功的关键。

3.CAR-T 细胞的扩增

经过基因改造后的 T 细胞通常需要在体外扩增到 105 -107细胞/kg 才能达到回输 剂量。传统的扩增方法主要有细胞培养瓶、培养袋、摇摆生物反应器，但工业生 产正逐步转向封闭式、自动化，一体化培养平台正在涌现，如 Lonza 的 Cocoon 平台和 MiltenyiBiotec 的 CliniMACS Prodigy 平台，有效减少对人工的依赖， 以及降低产品被污染的风险。

4.CAR-T 细胞的收集、存储及应用

首先需要收集和洗涤细胞，富集 CAR-T 细胞并除去杂质和干扰物等。随后，检 测细胞数量或 CAR 表达量并进行制剂分装。分装后的 CAR-T 制剂需要冷冻保存 和运输至医药。最后，采用静脉输液的形式临床给药，针对特定的病症，可能会 辅助应用局部注射。