影响单抗药物质量的关键因素有哪些？

在判定质量相 似性方面需要重点关注影响单抗药物质量的关键因素，包括蛋白质含量、糖基化、生物学活性、 纯度和杂质分析、不溶性颗粒、稳定性研究六个关键方面。

1、蛋白质含量

蛋白质是单抗药物中的主要成分，蛋白质含量是质量相似性评价的重要内容。原研药和生 物类似药的蛋白浓度应具有相似性，以评估生物类似药的制剂处方和规格和参照药一致性，保 障药品质量的相似性，生物类似药的制剂处方和规格原则上要和参照药一致。《中国药典》（2020 年版）中建议采用分光光度法进行总蛋白质含量测定，确定特异消光系数，蛋白质的消光系数 通常由氨基酸序列决定。在工艺开发阶段，需根据工艺参数，对蛋白质的消光系数进行测定和 评估，根据单抗药物建立可接受标准，确定消光系数。

2、糖基化修饰

糖基化修饰是单抗药物最重要、最复杂的修饰，是评价单抗药物的质量的重要因素。糖基 化修饰对单抗的构象、稳定性、溶解度、药物代谢动力学、活性及免疫原性等均有不同程度的 影响。糖基化影响单抗药物的有效性，不同糖基化修饰对单抗药物空间结构有着不同程度的影 响，进而影响单抗药物的作用机制和效应功能。另一方面，糖基化影响单抗药物的免疫原性， 不同的糖基化修饰可能引发免疫反应。《中国药典》中建议糖基化修饰分析可采取毛细管电泳 （CE）或高效液相色谱（HPLC）等方法，测定结果应根据不同的药物品种的具体工艺的相关 范围内。

3、生物学活性

单抗药物的生物学活性直接反映其临床应用的体内效力，是抗体药物质量控制的重要指标。 生物学活性测定单抗药物的有效成分、含量及药物效价，确保其药物有效性。生物学活性测定 主要是在体外建立相应的细胞评价模型，模拟其作客观的全程量效反应，并通过与活性标准品 的比较对其生物学活性进行评价。生物学活性对单抗药物筛选、表征、放行以及稳定性研究都 至关重要，生物学活性结果可反映药物的作用机制，线性、准确性、精密度、耐用性，生物学 活性测定具有较好的可操作性和稳定指示性等。

4、纯度和杂质

单抗药物的纯度和杂质直接反映了抗体纯化工艺水平及产品质量的高低。单抗药物的纯度 和杂质主要判定单抗药物中主蛋白与其他杂质的关系，测定是否出现变异体、制剂及其他工艺 相关杂质等。对纯度的测定，应从产品的疏水性、电荷和分子大小变异体及包括糖基化在内的 各类翻译后修饰等方面，考虑适宜的技术和方法进行研究；对杂质的比对试验研究，应从工艺 的差异、宿主细胞的不同等方面，考虑适宜的方法进行。《中国药典》中规定需检测分子大小 变异体、电荷变异体、制品相关杂质和工艺相关杂质。

5、不溶性颗粒

不溶性颗粒一般指的是粒径＜ 50μm 的微粒。单抗药物多为注射用药，不溶性颗粒很大 程度上影响用药的安全性，易导致过敏反应。不溶性颗粒的聚焦会导致结合位点和结合能力 产生差异，引起疗效降低。《中国药典》中规定每瓶≥ 10μm 的颗粒不超过 6000 个，每瓶 ≥ 25μm 的颗粒不超过 600 个。《美国药典》中规定微粒控制在 10μm-25μm 之间，但对于 分子量较大的蛋白质类药物，FDA 发布的指南建议蛋白质注射液应进一步检测 2-10μm 间的更 小的微粒 33，目前我国并未针对蛋白质或单抗药物注射液的不溶性颗粒检测要求做出特殊规定。

6、稳定性研究

稳定性研究通过设计试验获得单抗药物的质量特性在各种环境因素（如温度、湿度、光线 照射等）的影响下随时间变化的规律，以确定单抗药物的贮藏条件和有效期等。稳定性研究包 括影响因素试验，加速试验，长期试验，重点关注温度、湿度、光照等影响因素，影响稳定性 研究的结果，进而引起有效期改变。 实践中，由于单抗药物场地变更、工艺变更等不同因素，可能引起生产过程中温度、湿度、 光照等因素变化，导致稳定性研究结果发生变化，可能对单抗药物的贮藏条件和有效期产生影 响。因此存在不同厂家的生物类似药有效期存在差异的情况，例如利妥昔单抗原研药美罗华和 生物类似药汉利康、达伯华的有效期分别为 30、30、36 个月。此外，也存在同一厂家同品种 有效期变更的情况，例如曲妥珠单抗汉曲优的有效期从上市之初的 48 个月变更为 36 个月，后 再次变更为 12 个月。