三代测序技术对比情况如何？

以下内容是对三代测序技术对比情况的简单介绍。

以 1977 年 Sanger 等人发明的链终止法为代表，拉开第一代测序的帷幕。该方 法一次只能测一条单一序列，从头测序，从头组装，且准确性高达 99.999%， 目前仍有应用，但测序成本高，操作繁琐，通量低等缺点，限制了一代测序大 规模的使用。

 二代测序，是目前市面主流的高通量测序，NGS。它通过物理或化学方式将 DNA 打断成无数片段，建库后同时测序。因此二代测序通量有显著提升，且技术应 用成熟，受众较多。二代测序存在片段较短，部分序列无法扩增，造成信息丢 失；另外测序重叠区域的处理和分析也是一个难点。

 三代测序的代表是 PacBio 公司的 SMRT 和 Oxford Nanopore Technologies 纳 米孔单分子测序技术，测序过程无需进行 PCR 扩增，测序长度达到 10kb 左右， 更长的序列，能得到更为丰富的信息，适合应用于基因组分析。但单碱基识别 准确率稍差，是目前三代测序进一步应用的问题。